کلونینگ و توالی یابی پلاسمید کد کننده پروتئین میکرونم ۳ (mic۳) توکسوپلاسما گوندی

Authors

محمد جعفری مدرک

mohamad jafari-modrek فاطمه غفاری فر

fatemeh ghaffarifar department of parasitology, faculty of medicine, tarbiat modares university of medical sciences, tehran, i.r. iranتهران ، بزرگراه جلال آل احمد،پل گیشا، دانشگاه تربیت مدرس، گروه انگل شناسی زهره شریفی

zohreh sharifi عبدالحسین دلیمی اصل

abdolhosain dalimi-asl

abstract

سابقه و هدف: توکسوپلاسما گوندی، انگل تک یاخته درون سلولی اجباری و عامل توکسوپلاسموزیس در انسان و حیوانات بوده که در سراسر جهان انتشار دارد. پروتئین میکرونم 3 (mic3) با وزن ملکولی 90 کیلو دالتون، عامل چسبیدن انگل به سلولهای میزبان در آغاز تهاجم است و در تمام مراحل تکاملی از انگل ترشح شده و یک آنتی ژن قوی محسوب می شود؛ از این نظر علاوه بر ایمونوژن بودن و کاندید ساخت واکسن، در تشخیص نیز کاربرد دارد. هدف از این تحقیق، آماده سازی ژن mic3 در پلاسمید ناقل جهت ساب کلونینگ در پلاسمیدهای یوکاریوت و پروکاریوت است. مواد و روش ها: dna ژنومی توکسوپلاسما، با روش فنل-کلروفرم استخراج شد. با استفاده از آغازگرهای اختصاصی ژن mic3، ژن مورد نظر با روش pcr تکثیر شده و با استفاده از ژل آگارز، الکتروفورز گردید. محصول pcr، خالص شده و به کمک آنزیم t4dna ligase، به داخل یک وکتور کلونینگ کلون شد. در نهایت پلاسمید نوترکیب به داخل e.coli سوش top10 ترانسفورم گردید. با روش های pcr و برش آنزیمی و توالی یابی، کلون مورد نظرتائید شد.نتایج: محصول pcr به صورت یک باند 1052 جفت باز در ژل آگارز 1 درصد مشاهده گردید. پلاسمیدهای نوترکیب تحت برش آنزیمی دو آنزیم محدود کننده hindiii و ecorv قرار گرفت و دو باند 1052 و 2886 جفت باز به دست آمد که نشان داد قطعه mic3 در پلاسمید ptz57r/t کلون شده است.نتیجه گیری: نتایج به دست آمده نشان داد، کلونینگ و ترانسفورم ژن mic3 در پلاسمید ptz57r/t با موفقیت انجام شده است.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

کلونینگ و توالی یابی پلاسمید کد کننده پروتئین میکرونم 3 (MIC3) توکسوپلاسما گوندی

 سابقه و هدف: توکسوپلاسما گوندی، انگل تک‌یاخته درون سلولی اجباری و عامل توکسوپلاسموزیس در انسان و حیوانات بوده که در سراسر جهان انتشار دارد. پروتئین میکرونم 3 (MIC3) با وزن ملکولی 90 کیلو دالتون، عامل چسبیدن انگل به سلولهای میزبان در آغاز تهاجم است و در تمام مراحل تکاملی از انگل ترشح شده و یک آنتی ژن قوی محسوب می شود؛ از این نظر علاوه بر ایمونوژن بودن و کاندید ساخت واکسن، در تشخیص نیز کاربرد دا...

full text

کلونینگ و توالی یابی پلاسمید کد کننده پروتئین گرانولی متراکم ۱۴ سویه rh توکسوپلاسما گوندیی

سابقه و هدف: بیماری توکسوپلاسموز از بیماری های شایع در جهان می باشد که حدود یک سوم مردم دارای آنتی بادی بر علیه توکسوپلاسما هستند. این بیماری بیشتر به دلیل عوارض وخیم آن، در موارد مادرزادی و نیز بیماران نقص سیستم ایمنی اهمیت دارد. ژن کد کننده پروتئین 14gra می تواند به عنوان یک هدف مناسب جهت ساخت dna (deoxyribonucleic acid) واکسن و همچنین طراحی کیت تشخیصی مورد ارزیابی قرار گیرد. هدف از این بررسی...

full text

کلونینگ و توالی‌یابی پلاسمید کد کننده پروتئین گرانولی متراکم 14 سویه RH توکسوپلاسما گوندیی

Background and purpose: Toxoplasmosis is a common parasitic disease throughout the world and ‎one-third of the population has antibodies to Toxoplasma gondii. This disease causes serious medical ‎problems in fetuses and immunocompromised individuals. As gene encoding protein GRA14 can be ‎considered as a suitable target for DNA vaccine and designing diagnostic kits the aim of this study was to ...

full text

ارزیابی ایمنی زایی پلاسمید کد کننده آنتی ژن GRA5 توکسوپلاسما گوندی در موش BALB/c

سابقه و هدف: عوارض توکسوپلاسموز ضرورت یافتن واکسن مؤثری علیه این بیماری را مطرح می‌سازد. ایمن‌سازی با پلاسمید نوترکیب حاوی ژن‌های کد کننده پروتئین‌های محافظت کننده، راه‌کاری امید بخش برای ساخت واکسن به‌شمار می‌آید. تحقیق حاضر با هدف ارزیابی ایمنی‌زایی پلاسمید کد کننده آنتی‌ژن GRA5 توکسوپلاسما گوندی در موش BALB/c صورت گرفت. مواد و روش‌ها: این تحقیق تجربی روی 3 گروه 10 تائی موش BALB/c که به‌طور ت...

full text

ارزیابی ایمنی زایی پلاسمید کدکننده پروتئین میکرونم (mic3) توکسوپلاسما گوندی درموش balb/c

توکسوپلاسما گوندی یک انگل تک یاخته ای داخل سلولی است که موجب بیماری توکسوپلاسموز در انسان و حیوان میشود. انگل انتشارجهانی داشته و حدودیک سوم از انسانها سرم مثبت هستند. عفونتهای توکسوپلاسمایی در اکثر افراد سالم فاقد علامت بوده ولی در افراد با سیستم ایمنی ضعیف علائم شدیدتری ایجاد می کند. انگل توکسوپلاسما همانند سایر ارگانیسم های تک سلولی متشکل از آنتی ژنهای ایمنوژنیک فراوانی است. با وجود اینکه م...

15 صفحه اول

ارزیابی ایمنی زایی پلاسمید کد کننده آنتی ژن gra۵ توکسوپلاسما گوندی در موش balb/c

سابقه و هدف: عوارض توکسوپلاسموز ضرورت یافتن واکسن مؤثری علیه این بیماری را مطرح می سازد. ایمن سازی با پلاسمید نوترکیب حاوی ژن های کد کننده پروتئین های محافظت کننده، راه کاری امید بخش برای ساخت واکسن به شمار می آید. تحقیق حاضر با هدف ارزیابی ایمنی زایی پلاسمید کد کننده آنتی ژن gra5 توکسوپلاسما گوندی در موش balb/c صورت گرفت. مواد و روش ها: این تحقیق تجربی روی 3 گروه 10 تائی موش balb/c که به طور ت...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
فیض

جلد ۱۵، شماره ۳، صفحات ۲۰۰-۲۰۶

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023